彼得·帕克（由托比·马奎尔饰演）是一位普通美国家庭中学的学生。但在一个夜晚，因不慎被一只逃跑的变异蜘蛛咬伤，他的生活方式彻底改变。自此之后，他拥有了一连串如同蜘蛛般特有的能力—可以发射极强粘性且坚固到足以自由移动和悬挂在空中的蛛丝。最初，他非常兴奋于自己的变化，利用这些新的技能谋生以增加收入。但当其心爱的叔叔因为在一次非故意释放囚犯的过程中遭罪徒杀害时，他开始对这种力量抱有不同的看法，并立誓要用它们去维护正义、打击犯罪。同时，彼得的好友哈利的父亲诺曼博士（威廉·达福饰）是生物科技公司的创始者，陷入了麻烦当中；由于他们公司研发的一种飞行装备未获军方批准而导致经营困难。一次偶然进入充满致命毒气区域的经历让诺曼突显了非凡之力，这股突如其来的强大也唤醒了他的黑暗面。从那时起，这名发明家便驾着自己制造的高精密度科技飞船上阵，导致了一系列无辜受害者的死亡事件。面临这样的局面，“蜘蛛侠” 彼得勇敢站出来与反派势力抗争。